[生物—选修3：现代生物科技专题]
利用生物工程技术，可从转基因奶山羊乳汁中分离获得人凝血因子IV，用于血友病的治疗。请回答下列问题：
26．根据凝血因子IV基因上游和下游的碱基序列，可用____技术获取并扩增基因。构建该基因表达载体时，所用到的工具酶是_____，该基因表达载体中，凝血因子Ⅳ基因的上游和下游分别是________。
27．将目的基因表达载体导入奶山羊受精卵的常用方法是______。受体细胞选用受精卵的优点是细胞大易操作、营养物质含量高和_______。
28．在体外胚胎培养时，应选用囊胚的_____进行DNA分析，用于选择雌性胚胎。此期的胚胎也适于胚胎分割移植，此技术的优点是________。
29．人凝血因子IV是一种胞外酶，该蛋
正确答案
PCR 限制性内切酶和DNA连接酶 启动子和终止子
解析
可利用PCR技术扩增目的基因；用同种限制酶将目的基因切割出来，将运载体切开，用DNA连接酶将目的基因与切开的运载体连接起来；凝血因子Ⅳ基因为目的基因，在基因表达载体中，启动子位于目的基因的首端，终止子位于目的基因的尾端。
考查方向
解题思路
结合知识分析题干完成
易错点
凝血因子Ⅳ基因的上游和下游
正确答案
显微注射法 细胞全能性高
解析
显微注射技术是转基因动物中采用最多，也是最为有效的一种将目的基因导入动物受精卵的方法；受精卵细胞未分化，细胞全能性最高，且细胞大易操作、营养物质含量高。
考查方向
解题思路
结合知识分析题干完成
易错点
目的基因导入受体细胞的方法
正确答案
滋养层细胞 充分发挥雌性动物的生殖潜力（快速大量繁殖）
解析
从选修3P79牛胚胎性别鉴定和分割示意图可知取囊胚的滋养层细胞做DNA分析性别鉴定。胚胎分割有利于提高胚胎的利用率，胚胎移植可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力。
考查方向
解题思路
结合知识分析题干完成
易错点
胚胎分割移植的优点
正确答案
内质网、高尔基体 基因的选择性表达
解析
分泌蛋白是在内质网、高尔基体等细胞器上加工的；基因的选择性表达使人凝血因子Ⅳ只在乳腺。
考查方向
解题思路
结合知识分析题干完成
易错点
人凝血因子IV只在乳腺细胞合成的原因