11.为获得果胶酶高产菌株，科研人员进行了下列分离、筛选、鉴定工作。
（1）为分离果胶酶产生菌，科研人员配制了下表所示成分的培养基，该表空白处的两种成分是 。制备的培养基常用 法进行灭菌。
（2）科研人员将采集的果园土壤放入无菌水中
（3）选择单菌落数目适宜的培养基，加入一定浓度的刚果红溶液（果胶与刚果红结合后显红色），一段时间后洗去培养基表面的刚果红溶液，观察并比较菌落和直径的比值，筛选果胶酶高产菌株。
（4）将获得的菌株进行液体培养后，从培养液的 (填“上清液”或“沉淀物”)获得粗提的果胶酶。将一定量的粗提果胶酶与适量果胶溶液混合，一定时间后测定吸光值来测定酶活性。进行吸光值测定时，需将 与等量果胶溶液混合，作为实验的对照。
正确答案
（1）果胶和蒸馏水 高压蒸汽灭菌 （2）梯度稀释（或系列稀释），（稀释）涂布平板 倒置 （3）水解（透明） （4）上清液 等量失活的粗提果胶酶
解析
（1）由于实验目的是分离果胶酶产生菌，所以培养基中需要加入果胶，在配制过程中，需要用蒸馏水先配制成液体培养基，再凝固成固体培养基．制备的培养基常用高压蒸汽灭菌法进行灭菌．
（2）为获得较均匀分布的单菌落，还需要将悬液进行梯度稀释，并用稀释涂布法接种于固体培养基上．接种后的培养基倒置状态放入培养箱，防止培养皿盖上凝结的水珠落入培养基造成污染．
（3）选择单菌落数目适宜的培养基，加入一定浓度的刚果红溶液（果胶与刚果红结合后显红色），一段时间后洗去培养基表面的刚果红溶液，观察并比较菌落和水解直径的比值，筛选果胶酶高产菌株．
（4）将获得的菌株进行液体培养后，从培养液的上清液获得粗提的果胶酶．将一定量的粗提果胶酶与适量果胶溶液混合，一定时间后测定吸光值来测定酶活性．进行吸光值测定时，需将等量失活的粗提果胶酶与等量果胶溶液混合，作为实验的对照．
考查方向
本题考查分离和培养果胶酶高产菌株的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题和解决问题的能力．
解题思路
微生物的分离是研究和利用微生物的第一步，也是微生物工作的基本方法和重要环节．土壤中的微生物很多，本题中要从土壤中获得果胶酶高产菌株．接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法。
易错点
微生物的培养和分离