【生物—生物技术试验】(请回答33题)
乳糖酶能够催化乳糖水解为葡萄糖和半乳糖，具有重要应用价值。乳糖酶的制备及固定化步骤如下：
【生物—现代生物科技专题】（请回答34题）
治疗性克隆对解决供体器官缺乏和器官移植后免疫排斥反应具有重要意义。流程如下：
59.筛选产乳糖酶的微生物L时，宜用__________作为培养基中的唯一碳源。培养基中琼脂的作用是___________。从功能上讲，这种培养基属于___________。
60.培养微生物L前，宜采用__________方法对接种环进行灭菌。
61.纯化后的乳糖酶可用电泳法检测其分子量大小。在相同条件下，带电荷相同的蛋白质电泳速度越快，说明其分子量越___________.
62.过程①采用的是细胞工程中的 技术，过程②采用的是胚胎工程中的 技术。
63.体细胞进行体外培养时，所需气体主要有O2和CO2，其中CO2的作用是维持培养液（基）的 。
64.如果克隆过程中需进行基因改造，在构建基因表达载体（重组载体）时必须使用 和 两种工具酶。基因表达载体上除目的基因外，还需有 基因，以便选出成功导入基因表达载体的细胞。
65.胚胎干细胞可以来自于囊胚中的 。在一定条件下，胚胎干细胞可以分化形成不同的组织器官。若将图中获得的组织器官移植给个体 （填“A”或“B”），则不会发生免疫排斥反应。
正确答案
乳糖 凝固剂 选择培养基
解析
已知乳糖乳糖酶能够催化乳糖水解为葡萄糖和半乳糖，筛选产乳糖酶的微生物L时，宜用乳糖作为培养基中的唯一碳源，培养基中琼脂的作用是凝固剂，从功能上讲，这种培养基属于选择培养基。
考查方向
解题思路
利用乳糖酶只能将乳糖分解可判断出来。
易错点
分不清选择与鉴别培养基。
正确答案
灼烧
解析
为了避免杂菌污染，在培养微生物前，对接种环等接种工具应采用灼烧灭菌
考查方向
解题思路
对于实验用具、培养基等一般采用高压蒸汽灭菌。
易错点
混淆了灭菌与消毒的方法。
正确答案
小
（酶）活性[或（酶）活力] 包埋法 物理吸附法（注：两空可颠倒）
解析
用电泳法纯化乳糖酶时，若在相同条件下分离带电荷相同的蛋白质，则其分子量越小，电泳速度越快。
固定化酶的应用价值与酶的活性（或活力）有关，因此用化学结合法固定化乳糖酶时，可通过检测固定化乳糖酶的活性（或活力）来确定其应用价值。固定酶化的方法包括化学结合法、包埋法、物理吸附法、离子吸附法及交联法等。
考查方向
解题思路
掌握电泳法概念及操作原理。
掌握固定化细胞或酶的原理及流程。
易错点
注意带相同电荷的蛋白质等纯化时移动速率的影响因素。
注意不同固定方法针对的具体酶或细胞。
正确答案
（体细胞）核移植 （早期）胚胎培养
解析
过程①表示将从体细胞中分离出的细胞核与去核的卵（母）细胞重组形成重组细胞的过程，因此采用的是细胞工程中的（体细胞）核移植技术。过程②表示将重组细胞培养才早期胚胎的过程，所以采用的是胚胎工程中的（早期）胚胎培养技术。
考查方向
解题思路
掌握核移植的流程。
易错点
对于卵母细胞须培养到减数第二次分裂中期。
正确答案
PH（或酸碱度）
解析
在动物细胞培养时，CO2的主要作用是维持培养液（基）的PH（或酸碱度）。
考查方向
解题思路
掌握动物细胞培养的条件及各自处理的目的。
易错点
误认为二氧化碳在生物体内刺激呼吸中枢起体液调节作用。
正确答案
限制性（核酸）内切酶（或限制酶） DNA连接酶（注：两空可颠倒） 标记
解析
在基因工程中，在构建基因表达载体（重组载体）时必须使用限制性（核酸）内切酶（或限制酶）和DNA连接酶。基因表达载体的组成，除目的基因外，还必须有启动子、终止子以及标记基因等，其中标记基因的作用是筛选出成功导入基因表达载体的细胞。
考查方向
解题思路
基因工程操作的基本工具为限制酶和DNA连接酶。运载体。基因表达载体通常由启动子、目的基因、终止子、标记基因组成。
易错点
说不清基因表达载体构建包括哪些组成。
正确答案
内细胞团 B
解析
胚胎干细胞可以来自于囊胚中的内细胞团。图中获得的组织器官，其细胞核来自于个体B，其遗传物质组成几乎与个体B相同，因此将该组织器官移植给个体B则不会发生免疫排斥反应。
考查方向
解题思路
胚胎干细胞来源于内细胞团及原始性腺。具有发育的全能性。
易错点
分清发育全能性和全能性的不同，全能性是指离体的组织器官发育成个体。