人血清白蛋白(HSA) 具有重要的医用价值,只能从血浆中制备。下图是以基因工程技术获取重组HSA(rHSA)的两条途径。
55.未获取HSA基因,首先需采集人的血液,提取_____________合成总cDNA,然后以cDNA为模板,采用PCR技术扩增HSA基因。下图中箭头箭头表示一条引物结合模板的位置及扩增方向,请用箭头在方框内标出标出另一条引物的位置及扩增方向。
56.启动子通常具有物种及组织特异性,构建在水稻胚乳细胞内特异表达rHSA的载体,需要选择的启动子是_____________(填写字母,单选)。
57.利用农杆菌转化水稻受体细胞的过程中,需添加酚类物质,其目的是__________________________。
58.径II相比,选择途径I获取rHSA的优势是_______________________________________。
59.为证明rHSA具有医用价值,须确认rHSA与_________________的生物学功能一致。
总RNA (或mRNA)
合成总cDNA需提取细胞中所有的mRNA,然后通过逆转录过程。采用PCR技术扩增HSA基因时,两条引物分别与模板链的5’端结合,扩增方向相反。
结合知识分析题干完成
扩增方向
根据启动子通常具有物种及组织特异性,在水稻胚乳细胞内特异表达rHSA,需选择水稻胚乳细胞启动子。
结合知识分析题干完成
题中信息“物种及组织特异性”的应用
吸引农杆菌移向水稻受体细胞,有利于目的基因成功转化
农杆菌转化法中,添加酚类物质,是为了吸引农杆菌移向水稻受体细胞,有利于目的基因成功转化。
结合知识分析题干完成
酚类物质作用
水稻是真核生物,具有膜系统,能对初始rHSA多肽进行高效加工
结合题意可知,HSA多肽的合成需要膜系统,而只有在真核生物中存在膜系统,所以,途径I获取rHSA的优势是水稻是真核生物,具有膜系统,能对初始rHSA多肽进行高效加工。
结合知识分析题干完成
生物膜系统
HSA
为证明rHSA具有医用价值,须确认rHSA与天然的HSA生物学功能一致
结合知识分析题干完成
目的基因的检测与鉴定